1、收集6孔板中的培养液于离心管中，1000rpm/min,离心10分钟，真空泵抽走上清液。
2、加入含EDTA的胰酶进行消化，待消化ok后，加入含10%FBS的DMEM终止消化，轻轻吹打细胞，将细胞悬液收集到离心管中。1000rpm/min,离心10分钟，真空泵抽走上清液。
3、逐滴加入5ml或更多预冷的70-80%的乙醇，涡旋以混匀细胞， 4°C避光过夜（>18小时）。若长期保存，将固定的细胞放于-20°C.
4、1500rpm/min, 离心细胞10分钟，弃上清。之后清洗细胞2次以去除所有的乙醇。注：第一次用1x PBS，第二次用染色液。
5、 细胞染色：每管样本需10^6细胞。具体操作如下：A. 对于PI/RNase 染色，将细胞重悬于0.5 mL PI/RNase 染色液。B 对于7-AAD染色，将峙僮侯劝细胞重悬于0.1 mL 染色液，同时加入20 μL7-AAD染色液。
6、室温避光孵育15分钟。
7、分析前4°C避光保存样本，1小时之内上流式细胞仪检测。
