外源基因蛋白的诱导表达及蛋白质分离的方法

1、首先，分别挑取经PCR 鉴定为阳性的克隆和对照中的菌落，分别接种于含有卡那霉素(终浓度50pg 'mI)的液体LB培养基中，在37C、250r /min条件下培养过夜。

3、然后，加人IPTG(终浓度为0.5mmol/L)，在37C、250r/min条件下培养，进行外源基因的诱导表达，期间按不同的时间分别收集菌体，探索蛋白质最佳表达时间。

5、然后，在沉淀中加人2mL 的10mmol/L 的Tris.CI 缓冲液(pH8.)，再加2mL19 6的Triton X- 100，加溶菌酶至终浓度为100pg/mL，于30~C保温30min。