蛋白质的银染方法

 时间:2024-10-21 09:35:02

1、首先,戴上手套,将凝胶移至一个盛有50%甲醇: 10%醋酸混合液(1:1)混合的小容器内,至少浸泡1h,期间换液2~3 次。

蛋白质的银染方法

2、然后,用清水漂洗30min,期间至少换水3 次。此时可准备溶液A、B.C,将凝胶移人一个干净的容器内,在持续温和的振摇下用溶液C染色15min。

蛋白质的银染方法

3、然后,用去离子水漂洗凝胶,在轻轻振摇下浸泡2min,此时准备溶液D。

蛋白质的银染方法

4、然后,将凝胶移至一个干净的容器内,用溶液D洗涤,显色。注意:银染的电泳带一般在10min 内出现,否则更换溶液D;如果背景已开始变为淡黄色,则应该停止反应。

蛋白质的银染方法

5、然后,将凝胶浸人1%的醋酸终止反应,在蒸馏水中漂洗凝胶至少1h,期间换水3次。

蛋白质的银染方法

6、最后,如果蛋白质染色太深,则可用固定液(Kodak Rapid Fix)或脱色液(Kodak Rapid Un-fix)使电泳胶脱色,再用封闭液(Kodak clearingagent)终止脱色,然后用50%甲醇:10%醋酸漂洗,将凝胶保存于水中或进行干胶。

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